“膜” 法學院之常見問題解決篇—困擾多時的問題都有解答了！

上期我們?yōu)槟榻B了如何根據(jù)您的實驗需求選擇合適的超濾管，本期我們總結(jié)了超濾管使用過程中經(jīng)常遇到的問題，分析問題產(chǎn)生的原因并給您一個完美的解決方案。

超濾膜一次使用就碎了？可能和我們的離心機有關(guān)系

超濾管如果離心轉(zhuǎn)速過高，可能會導致膜甚至管子的破裂。離心機的轉(zhuǎn)速與離心機的半徑以及離心力都有關(guān)系，不同半徑的離心機，相同轉(zhuǎn)速出來的離心力也不一樣，可以公式換算！說明書中明確指出使用超濾管的最大轉(zhuǎn)速和離心力，做實驗時要根據(jù)不同品牌的超濾管調(diào)整到離心力的承受范圍內(nèi)。另外，超濾管在離心機中的擺放也是有講究的，使用角轉(zhuǎn)子時，超濾管放置方式要求印有刻度一側(cè)朝上|朝外(這樣雙面膜才能發(fā)揮切向流的作用)，使用水平轉(zhuǎn)子沒有特殊要求；要不也會發(fā)生破裂哦～在濃縮管中加入樣品，不得超過最大體積。（以Turbo15 為例，若使用水平轉(zhuǎn)子不得超過15ml 樣品，若角轉(zhuǎn)子則9ml）

雙面垂直膜--窗口朝上

單面垂直膜--刻度面朝上

另外，還要注意的是，離心15ml或是50ml外管的超濾管zui好使用尖底的轉(zhuǎn)子，因為超濾管的底部是尖底的。如果使用圓底的轉(zhuǎn)子，有可能無法把樣品管放滿，或是會增加外管底部磨損破損的幾率。

脫鹽濃縮，一個超濾管就可以搞定

濃縮用超濾管，脫鹽用透析袋或脫鹽柱，這是很多實驗室一直沿用的實驗操作。其實呢，超濾管做“脫鹽+濃縮”，也是很多蛋白操作高手的小訣竅。而如果你的樣品量有幾十毫升甚至幾升，選擇賽多利斯的超濾膜包會在一小時之內(nèi)完成自動換液，非常的方便哦！

另外，賽多利斯的超濾管也有針對于換液的特殊設計：

a.加2ml樣品到濃縮管

b.清空濾過管

c.插入滲濾小管到濃縮管，加入10ml去離子水或是緩沖液。旋上蓋子

d.重復濃縮步驟，會有98%的無機鹽濾過

e.去除滲濾小管，回收濃縮后的樣品

我用濃縮后的蛋白做下游分析時發(fā)現(xiàn)有干擾，可能原因

超過濾薄膜含有微量甘油和NaN₃。 如果此材料干擾分析，可用緩沖液或去離子水預清洗。如果干擾仍然存在，用0.1 N NaOH清洗，然后用緩沖液或去離子水再次清洗后甩干。同樣需要強調(diào)的是，如果用NaOH處理，可能會對RC膜有一定影響，所以，盡量選擇PES膜并且避免過夜浸泡。

Vivaspin超濾管系列具有專利的尖角死體積樣品安全保護技術(shù)，防意外甩干，給珍貴的樣品更多一道保障！另外，根據(jù)蛋白的分子量和體積的不同，Vivaspin系列有多達24種不同選擇。樣品處理體積包括從100μl到20ml，截留分子量也涵蓋了2KDa到0.2um。

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