瓊脂糖凝膠電泳儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳,廣泛用于核酸的研究,為DNA分子及其片段的分子量測(cè)定和DNA分子構(gòu)象分析提供了重要手段。
瓊脂糖凝膠是從瓊脂中精制出來的白色膠狀多糖,是由1,3連接的β-D吡喃半乳糖和1,4連接的3,6脫水β-D吡喃半乳糖交替而成的中性物質(zhì)。瓊脂糖由于氫鍵和其它力的作用使其相互盤繞成繩狀瓊脂糖束,而形成大網(wǎng)孔型凝膠。
瓊脂是從海藻中提取出來的多糖體,主要由瓊脂糖(約占80%)和瓊脂膠組成。瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強(qiáng)酸性多糖,從瓊脂膠中脫去硫酸酯基和丙酮酸酯基可獲得瓊脂糖。瓊脂膠和瓊脂糖的結(jié)構(gòu)相似,但由于瓊脂膠含硫酸根和羧基,凝膠能力差;瓊脂糖中存在極微量的硫酸根和丙酮酸酯基取代電離基團(tuán),在電場(chǎng)作用下能產(chǎn)生較強(qiáng)的電滲;硫酸根可與某些蛋白質(zhì)作用,從而影響電泳速度和分離效果。因此,在瓊脂糖凝膠制備過程中需要把瓊脂膠盡量除去。質(zhì)量較好的瓊脂糖凝膠的硫酸根含量較低,通常小于0.2%,電滲較小。
標(biāo)簽:
相關(guān)技術(shù)