出現(xiàn)污染后，我們首先考慮可能是試劑的污染，更換新批號的HBV試劑重新檢測后，結果仍為全部標本陽性。 將HBV標本拿到其他正規(guī)的PCR實驗室檢測，結果標本中陰、陽性結果都有，陰性對照是陰性，陽性對照是陽性，說明標本沒有被污染將兩種批號的HBV試劑拿到其他正規(guī)的PCR實驗室檢測，也顯示試劑沒有問題。 我實驗室用消毒液擦拭工作臺面后，打開所有的紫外燈照射一天，將所使用微量進樣器、離心管、槍頭、手套、記號筆、記錄本等都更換掉，再將HBV標本進行檢測，結果全部標本仍然為陽性。 用消毒液擦拭工作臺面后，打開所有的紫外燈照射一天，將HBV標本重新檢測，同時設置了兩個陰性對照(A和B)，A 陰性對照為將試劑的反應管從試劑盒中拿，打開反應管的蓋子，在空氣中暴露10 min，蓋上蓋子，上機檢測；B陰性對照為將試劑的反應管從試劑盒中拿，不開蓋子，直接上機檢測。結果是全部標本和A陰性對照為陽性，而B陰性對照為陰性。 至此，雖然還查找不到污染源是什么，但有一點可以肯定，PCR實驗室污染是氣溶膠擴散而引起的后來經過調查，發(fā)現(xiàn)污染是由于本室工一位工作人員在打掃實驗室衛(wèi)生時，用擴增區(qū)的掃笤和拖把打掃了標本制備區(qū)的衛(wèi)生引起。 在確定了污染的原因后，我們就開始著手排除污染，每天都打開整個PCR 實驗室的門窗和排氣扇，讓整個實驗室通風，用消毒液擦拭整個PCR實驗室，打開所有的紫外燈照射。 每隔3 d按3．5步驟檢測一次，一直這樣處理了一個月，A陰性對照才轉為陰性。連續(xù)檢測三次A和B陰性對照，每次結果都均為陰性，才確定PCR實驗室恢復正常。 通常我們對PCR實驗室污染的預防是采取隔離不同操作區(qū)、分裝試劑、改進實驗操作等規(guī)則，對污染的處理是用稀鹽酸擦拭或浸泡；紫外線照射法等。而對于實驗室的通風方面沒有給予足夠的重視，為了防止實驗區(qū)間之間的相互污染，各個實驗區(qū)間都是盡可能的密閉，從而使得實驗室出現(xiàn)PCR產物殘留污染的幾率增大。 從本次PCR實驗室污染排除的過程來看．我覺得污染得以排除的一個關鍵是通風。適當?shù)慕o予實驗室通風，可起到空氣稀釋的作用，有利于PCR產物殘留量的減少，加快實驗室污染的排除。