一材料與方法

1.主要材料

重組禽流感病毒(H9N2亞型，JY株)原液，由哈藥集團生物疫苗有限公司提供，禽流感病毒由H9亞型HI試驗抗原，由中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所提供,21 – 28日齡SPF 雞，由山東濟南斯帕法斯家禽有限公司提供• SPF種蛋，哈藥集團生物疫苗有限公司自行孵化出雛飼養(yǎng)所需日齡。

2.主要試劑。

國內外四個不同企業(yè)的白油編號為A. B, C、D.

3.主要儀器與設備

普通恒溫培養(yǎng)箱、干熱滅菌箱、八道數(shù)字式可調微址移液器.Tip頭.禽用負壓隔離器、孵化器、水平層流凈化工作臺、乳化機、黏度計、微量放血凝板. 微量振獲器等。

4.試驗方法

選擇國內和國外四家白油A，B, C.D)，并與乳化工藝中乳化機的三種頻率(30HZ，40HZ，50HZ)做交叉試驗，共制備出12種不同的配比試驗產(chǎn)品(表1 > • 根據(jù)獸用生物制品生產(chǎn)和檢 驗規(guī)程，分別進行性狀檢驗.無菌檢驗、安全檢驗和效力檢驗，根據(jù)結果綜合評定用禽流感j y株的最優(yōu)白油佐劑及乳化機頻率•

二、結果與分析

1.性狀檢驗

12個樣品交叉試驗結果外觀均為乳白色乳狀液，油包水劑型，黏度測定B-40值最低，檢驗結采均合格(見衣2>, 但D-30 組表現(xiàn)粘度明顯高于其他白油所乳化的疫苗，在動物免疫時.可能會造成注射費力，吸收緩慢，應激增大, 抗體低下，

2.無菌檢驗。

交叉試驗的12個樣品，經(jīng)TG小瓶3d后移植，TG、 CA. GP培養(yǎng)7d后無菌檢驗結果均為陰性，無菌生長(表略)。

3.安全檢驗。

交叉試驗的12個樣品的免疫雞只免疫后14d全部健活，且沒出現(xiàn)由因疫苗引起的局部和全身不良反應(犮略h

4.效力檢驗。

效力檢驗結果：

A—30 為 8 • 5 log2，B—30 為 8 • 7 log2 •

C-30 為 8.71og2,D-30 為 8.4 Iog2.

A-40 為8.91og2, B-40為9.11og2.

C-40為8.81og2. D-40為8_5tog2,

A-50為8.81og2. B-50為9.01og2,

C-50 為 8.81og2,D-50 為 8.61og2,

均達到國家標準：免疫雞HI抗體效價均高于1：64 (61og2),對照雞HI抗體效價均低于 1 ：4 (21og2)(表略)。最終確定B-40為最優(yōu)組合.乳化機頻率為40HZ。