加強和規(guī)范色譜柱的管理有效延長使用壽命

作者： 2019年05月20日 來源：全球化工設(shè)備網(wǎng) 瀏覽量：
字號：T | T
高效液相色譜法是20世紀70年代急劇發(fā)展起來的一項高效、快速的分離、分析技術(shù)。液相色譜法是指流動相為液相的色譜技術(shù)，在經(jīng)典的液相色譜法基礎(chǔ)上，引入氣相色譜法理論，在技術(shù)上采用高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢
     高效液相色譜法是20世紀70年代急劇發(fā)展起來的一項高效、快速的分離、分析技術(shù)。液相色譜法是指流動相為液相的色譜技術(shù)，在經(jīng)典的液相色譜法基礎(chǔ)上，引入氣相色譜法理論，在技術(shù)上采用高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測器，實現(xiàn)了分析速度快、分析效率高和操作自動化，它具有高壓、高速、高效、高靈敏度等特點。
    它是用高壓輸液泵將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑，緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，經(jīng)進樣閥注入供試品，由流動相帶入柱內(nèi)，在柱內(nèi)各成分被分離后依次進入檢測器，色譜信號由記錄儀、積分儀或色譜工作站記錄。
    高效色譜柱是高效液相色譜的心臟，在高效液相色譜儀的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性，延長柱子的使用壽命非常重要。
    色譜柱使用一段時間后就會出現(xiàn)柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時間改變等變化，如不采取措施，將會縮短色譜柱的使用壽命，影響工作效率，并造成一定的經(jīng)濟損失。因此，有必要加強和規(guī)范色譜柱的管理，從而延長色譜柱的使用壽命。
    影響色譜柱使用壽命的因素
    1 流動相
    在以水溶液為流動相時，水溶液中的微生物例如細菌容易生長，當用水溶液或有機酸緩沖液保護柱子時，一些霉菌可能在色譜柱中滋生，堵塞固定相顆粒間的空隙。由于濕法填充技術(shù)的問世，目前普遍使用的色譜柱填料直徑一般都小于10um，流動相中的顆粒雜質(zhì)很容易先沉積在柱頭然后慢慢堵塞柱子。流動相的pH值對色譜柱也有影響，特別是對化學(xué)鍵合硅膠填料，水溶液的pH***適范圍在2~7.5之間，當pH>8時，硅膠會釋出生成絮狀物堵塞柱子，且難以復(fù)原，柱效很快降低，甚至完全失效。
    當在緩沖液中加入有機溶劑例如甲醇或乙腈時，鹽類的溶解度下降，會析出鹽沉淀，堵塞柱子。同時流動相中的有機溶劑和鹽會腐蝕色譜柱頭的篩板，產(chǎn)生柱頭凹陷。流動相的極性對柱子也有一定影響，對于硅膠柱，甲醇、水、冰乙酸等極性較大物質(zhì)會破壞填料；反之，對于化學(xué)鍵合硅膠，極性小的物質(zhì)如正丁醇、二氯甲烷等也起同樣的作用。堿性溶液會破壞陽離子交換樹脂色譜柱，而酸性溶液容易損壞陰離子交換樹脂柱。
    2 樣品和固定相
    如果有少量或微量的樣品不能夠溶解在流動相中，在通過固定相會堵塞柱子，樣品中的顆粒雜質(zhì)也會堵塞柱子。樣品組分例如糖、蛋白質(zhì)等通過柱子時會產(chǎn)生不可逆吸附，這樣固定相的活性點被覆蓋。樣品組分還會與固定相產(chǎn)生反應(yīng)，尤其是對于氨基柱的影響較為嚴重。因為氨基易與酐、酮形成希夫(Schiff)縮合而減少活性點，使保留時間縮短。色譜柱鍵合相基團脫落、固定相分解和活性基團變性以及會影響柱效和保留時間的顯著改變。大多數(shù)鍵合相都是通過硅氧硅鍵(Si-O-Si)連接在硅基質(zhì)上，形成帶有有機基團的固定相Si-O-Si-R(R為CnH2n+1)，硅氧硅鍵可能在水溶液中水解而斷裂，使鍵合基團脫落。
   
全球化工設(shè)備網(wǎng)（http://www.bhmbl.cn ）友情提醒，轉(zhuǎn)載請務(wù)必注明來源:全球化工設(shè)備網(wǎng)！違者必究.
免責聲明：1、本文系本網(wǎng)編輯轉(zhuǎn)載或者作者自行發(fā)布，本網(wǎng)發(fā)布文章的目的在于傳遞更多信息給訪問者，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點，同時本網(wǎng)亦不對文章內(nèi)容的真實性負責。
2、如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)和其它問題，請在30日內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，我們將在第一時間作出適當處理！有關(guān)作品版權(quán)事宜請聯(lián)系：+86-571-88970062