隨著重組蛋白表達(dá)技術(shù)的不斷成熟,在蛋白序列上插入以His-tagged(組氨酸)、GST-tagged(谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶)等為代表的標(biāo)簽分子作為通用方法,其制備的融合蛋白在表達(dá)、檢測(cè)、示蹤和純化等方面表現(xiàn)出巨大的便利性,廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)基礎(chǔ)研究和大規(guī)模生產(chǎn)階段等方面。金屬螯合層析是純化His-tagged融合蛋白的首選方法,具有特異性強(qiáng)、洗脫條件溫和等特點(diǎn),已成為重組蛋白純化領(lǐng)域的通用方法之一。面對(duì)生物上游技術(shù)突飛猛進(jìn)的發(fā)展,如何提升重組蛋白純化處理能力,是層析領(lǐng)域亟待解決的問題。
日前,中國(guó)科學(xué)院過程工程研究所國(guó)家生化工程技術(shù)研究中心(北京)開發(fā)出新型高載量金屬螯合介質(zhì),通過向金屬螯合介質(zhì)內(nèi)部引入線性大分子,并對(duì)其進(jìn)入程度進(jìn)行有效調(diào)控,從而極大地提高了介質(zhì)結(jié)合蛋白能力,對(duì)His-tagged標(biāo)簽蛋白的最大吸附載量比市售進(jìn)口介質(zhì)提高兩倍以上。與此同時(shí),介質(zhì)的穩(wěn)定性能和流通性能也大大改善,流速較市售進(jìn)口介質(zhì)增加約30%,耐壓性顯著提升。這種新型高載量金屬螯合介質(zhì)在大規(guī)模重組蛋白純化領(lǐng)域極具應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。相關(guān)研究?jī)?nèi)容作為封面文章發(fā)表在Journal of Separation Science上 [Lan Zhao, Jingfei Zhang, Yongdong Huang et al. Efficient fabrication of high-capacity immobilized metal ion affinity chromatographic media: The role of the dextran-grafting process and its manipulation, Journal of Separation Science, 2016, 39, 1130-1136]。
該研究得到了國(guó)家科技支撐計(jì)劃(No. 2013BAB01B03)和“863”計(jì)劃(No. 2014AA021006)等項(xiàng)目支持。
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