液相色譜儀使用注意事項

安裝液相色譜儀的實驗臺應水平，穩(wěn)固，并具有足夠的放置空間；避免在具有腐蝕性氣體、大量灰塵或能產(chǎn)生強磁場的地方安裝本儀器，否則將會影響儀器的正常運轉并且縮短儀器使用壽命；由于儀器所用溶劑是易燃并且有毒，故安裝設備的房間應徹底通風，且具有向外排風的裝置，否則會引起中毒或身體不適，也會引起火災；應安裝四個以上三芯電源插座（220V, 5~10A）,必須具有專門的接地線（注意， 絕不能將電源線的中線作為接地線） ， 并確保儀器電源的電壓穩(wěn)定在交流 （220±22）V，否則會導致儀器的不正常運作甚至損壞儀器；如果實驗室無專用的接地線，一般可用Φ15~20mm 的銅棒打入地下 1~1.5米，用Φ1.2mm 左右的塑膠單股導線連接到電源插座的接地端。如果實驗室電壓不穩(wěn)定或者不在交流（220±22）V 范圍內(nèi)，則必須使用具有足夠功率的穩(wěn)壓器等必要設備，使電源電壓穩(wěn)定。
實驗室的室溫盡可能控制在 15℃-30℃范圍內(nèi)，并且波動要??；濕度在45%-85%范圍內(nèi)；
由空調(diào)或其他設備產(chǎn)生的氣流不要直吹儀器，避免光線直射及振動；
儀器啟動順序：先開高壓恒流泵和紫外檢測器，待紫外檢測器自檢完畢，回到默認波長 254nm 后，打開工作站軟件；
儀器關閉順序：先按泵停止，關閉氘燈，退出工作站軟件，然后再關儀器。
儀器應由專人負責，明確使用情況，及時處理和保養(yǎng)。

使用注意事項
流動相使用的注意事項
須使用 HPLC 級或相當于該級別的流動相，并要先經(jīng) 0.45μm 薄膜過濾。
過濾后的流動相必須經(jīng)過充分脫氣，以除去其中溶解的氣體（如 O 2 ） ，如不脫氣易產(chǎn)生氣泡，增加基線噪聲，造成靈敏度下降，甚至無法分析。
幾中脫氣方法比較：
1. 氦氣脫氣法：利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續(xù)吹氦脫氣，效果較好，但成本高。
2. 加熱回流法：效果較好，但操作復雜，且有毒性揮發(fā)污染。
3. 抽真空脫氣法：易抽走有機相
4. 超聲脫氣法：流動相放在超聲波容器中，用超聲波震蕩 10-15 分鐘，此法效果較差，但操作簡單。
如果管路中使用 peek 樹脂部件，請不要使用下列流動相：
濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氫呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亞砜

特別注意：
含有緩沖鹽溶液的流動相的清洗方法：
1 ．  先用 10 ：90  的甲醇/ 水沖洗 1  小時以上，以洗去緩沖鹽
2 ．  再用 90 ：10  的甲醇/水，沖洗系統(tǒng)，并將系統(tǒng)保存在該流動相中。清洗時間至少為 40分鐘。流動相的更換
在分析過程中，有時需要更換流動相進行分析。一定要注意前一種使用的流動相和所更換的流動相是不是能夠相溶。 如果前一種使用的流動相和所更換的流動相不能夠相溶，那您就要特別注意了。要采用一種與這二種需更換的流動相都能夠相溶的流動相進行過渡、清洗。較為常用的過渡流動相為異丙醇，但實際操作中要看具體情況而定， 原則就是采用與這二種需更換的流動相都能夠相溶的流動相。一般清洗的時間為 30-40 分鐘，直至系統(tǒng)完全穩(wěn)定。如不進行以上“特別注意”上述步驟的操作，將會導致系統(tǒng)管路堵塞。嚴重時將引起流通池污染堵塞，不得不更換流通池。用戶就要承擔不必要的損失了。
儲液器的注意事項
保持流動相儲液器的清潔是保證儀器正常使用的關鍵。 要使用 HPLC 級的溶劑，對試劑含有緩沖鹽及非 HPLC 級的流動相一定要用 0.5μm 過濾器除去其中的微粒物質(zhì)。管路連接的注意事項
1. 將管子完全插入開口端， 直至其與開口端的末端相碰為止。 否則將產(chǎn)生死體積，引起峰展寬。
2. 為了使柱外效應減到最小， 獲得理想的分析結果， 盡量使用管徑細的管路作為連接。
3. 管路接頭不要擰的過緊，以防損壞螺紋?；静僮髯⒁馐马?br /> 泵運行前先打開排空閥，用注射器抽出流動相，觀察 10 秒，流動相應連續(xù)流出；
不用排空閥時應將其關閉，否則大氣壓力會使流動相從排空閥出口流出；在使用儀器過程中，注意貯液瓶里的流動相是否夠用，如快用盡，應及時更換；
更換流動相時務必停泵，防止吸入大量空氣，影響儀器正常運作；
在啟動分析進樣時，請快速板動 7725i 進樣閥，否則會引起系統(tǒng)壓力突跳，
影響儀器的使用壽命；
如對樣品分析的定性定量要求較高，應配置柱溫箱，保持溫度恒定；
若流動相不是純甲醇，樣品分析結束后，必須用 HPLC 級甲醇對泵及進樣閥進行清洗，大約半小時后，待壓力重新回落并穩(wěn)定，方可關泵；
若流動相中含有緩沖鹽，則須根據(jù)其特殊的清洗方法進行清洗（上述已提到過） 。
 
 
 
各單元日常維護
色譜柱的保養(yǎng)事項
為了保護色譜柱，延長其使用壽命，在使用時應采取以下幾方面措施：
應在柱頭加燒結片不銹鋼濾片，需要時加保護柱，防止柱頭堵塞，影響分析效果；流動相 PH>7 時用大粒度同種填料作預柱；溶劑的化學腐蝕不能太強；要避免微粒在柱頭沉降；
為防止高壓沖擊，泵上的壓力限制不宜太高，一般在 15~20MPa 為宜，在舊柱或梯度洗脫時應稍高些，以避免因上限設置過低而造成正常使用中的中途停機；色譜柱長時間不用，存放時，柱內(nèi)應充滿溶劑（甲醇或乙腈） ，兩端封死。
使用柱溫箱，使色譜柱保持在一個相對恒定的溫度，能有效延長色譜柱的使用壽命。

手動進樣閥的維護注意事項
在每次使用后，尤其是進濃度差異比較大的樣品時要用專用工具（不是帶針頭的注射器）沖洗進樣閥，沖洗時必須沖洗進樣閥兩頭數(shù)次，每次數(shù)毫升。以防止無機鹽沉積和樣品微粒造成閥內(nèi)部磨損或阻塞以及樣品的交叉污染。
安裝時進樣閥的 5，6 出口要與注射器在同一水平線上，以防止虹吸現(xiàn)象的發(fā)生，導致進樣量的重復性變異。
進樣量的多少要根據(jù)定量管的環(huán)體積決定：
當樣品量較少時：進樣體積由注射器的進樣體積決定，但最大體積要小于環(huán)體積的 1/2。
當樣品量較多時：進樣體積由定量管的體積決定，為保證樣品完全把定量管的流動相置換干凈，需注射 5-6 倍的環(huán)體積。
要使用專用的液相注射器進樣，絕對不可用氣相注射器尖針頭進樣。注射器前應用專用的樣品過濾器。

高壓恒流泵的維護注意事項
泵的密封圈是最易磨損的部件，密封墊圈的損壞可引起系統(tǒng)的許多故障。密封墊圈的壽命與墊圈的材料質(zhì)量，使用壓力大小、保養(yǎng)以及緩沖液的情況而定。采取下列措施可以延長墊圈的壽命：
絕對不允許在沒有流動相或流動相還沒有進入泵頭的情況下啟動泵而造成柱塞桿的干磨；
每天使用后應將整個系統(tǒng)管路中的緩沖液體洗干凈，防止鹽沉積，整個管路要浸在無緩沖液的溶液或有機溶劑中；長期不用也在定期開泵沖洗整個管路；
用 HPLC 級試劑；
使用不銹鋼濾芯， 以注意防止因泵阻塞造成壓力過高而損壞柱塞桿或燒壞電機；
壓力下限應設置在 0.5~1MPa,以防止儲液器中的流動相被抽干或嚴重滲漏而引起柱塞桿的干磨；
有柱后清洗功能的高壓恒流泵還要注意保留清洗液， 否則將失去柱后清洗效果。
 
 
泵的壓力不穩(wěn)定
在安裝調(diào)試時以及在日常使用過程中， 若出現(xiàn)壓力不穩(wěn)的現(xiàn)象。 原因有幾點：
管路里有氣泡，建議由流動相多走些時間?；虼蜷_排空閥，用配件里的針筒多抽幾下。 還有就是關緊排空閥， 堵住檢測器上的背壓管， 使流通池的壓力增加，趕出氣泡。
輸入單向閥失效所致，這也是經(jīng)常遇見的。首先如何判斷輸入單向閥失效。
判斷步驟為：
如果是雙泵梯度分析系統(tǒng)，故泵壓力不穩(wěn)必然是其中一臺泵壓力不穩(wěn)所致，須逐個分析。
1. 在不開 UV 檢測器， 工作站的前提下，將其中一臺泵接上蒸餾水作為流動相。
2. 打開排空閥，用針筒抽出些流動相，確認泵中已有該流動相，然后將針筒內(nèi)的液體排出，并重新接在排空閥上。
3. 按“設置”鍵直至出現(xiàn)“沖洗”字樣， 按鍵選擇是，按兩次確認鍵，啟動沖洗功能。流量 5ml/min，時間 5min（注意：此時排空閥仍要打開，否則將沖壞色譜柱）
4. 沖洗完畢后，查看針筒內(nèi)流動相體積是否為 25ml（5×5=25） ，若正確，則說明該泵在低壓情況下無故障；若不正確，則說明該泵中某一單向閥失效（一般為輸入單向閥） 。
5. 用同樣方法測試另外一泵
6. 等度只要測試一臺就可以了。
造成單向閥失效原因：
1．液相色譜從成品到客戶手中有一段時間，出廠前每臺儀器都要經(jīng)過調(diào)試，一段時間內(nèi)不用會造成內(nèi)部殘留流動相與寶石球粘連的情況。 客戶長期不用也會造成類似情況，建議客戶在長期不使用情況下，每周用甲醇作為流動相，開機 1小時使管路充滿液體。
2．流動相內(nèi)雜質(zhì)或其它原因污染了單向閥。雖然有的客戶認為流動相已過濾過了，但長期使用后，由于液相色譜是微量分析儀器，難免會產(chǎn)生類似情況。這是液相色譜的普遍現(xiàn)象， 國內(nèi)外的泵只要是被動單向閥， 都會有類似現(xiàn)象發(fā)生，這并不是儀器的質(zhì)量問題，而是日常維護的一部分?，F(xiàn)在介紹一個簡單而有效的單向閥失效的處理辦法。

單向閥失效處理方法：
1. 擰下輸入單向閥（一共兩個）
2. 將 2 個單向閥放入有蒸餾水的超聲波清洗器，清洗 10 分鐘。
3. 用本公司提供的專用針頭沖一下 （將針頭擰緊在單向閥輸入端即可， 見配件清單） 。沖的時候注意要用手按住單向閥前頭的墊圈，防止沖時墊圈被沖落。
4. 完畢后，將輸入單向閥裝回原位即可。 （注意單向閥須擰緊）
若兩個泵在低壓狀態(tài)下流量都正確， 則建議分別將兩泵連接上色譜柱進行高壓測試。
高壓測試具體操作方法：
 
1. 在雙泵分析系統(tǒng)連接的前提下，只須先打開其中一泵（確認接好流動相）
2. 設置流量 1ml/min
3. 啟動泵
4. 觀察運行期間，泵的壓力是否穩(wěn)定。若穩(wěn)定，說明泵無問題；若泵壓力不穩(wěn)，則應檢查各管路接頭有無泄露，并將有泄漏的接頭擰緊；若無泄漏，則問題可能還是出在單向閥上，須再次沖單向閥，反復試驗。
（注：不必打開 UV 檢測器）
5. 重復上述步驟，對另一臺泵進行高壓測試
如還出現(xiàn)壓力不穩(wěn)的情況，有可能密封圈受損，建議更換。
紫外檢測器的維護注意事項
要保持檢測器中流通池清潔，每天用后注意沖洗整個管路。要定期用強溶劑
反向沖洗檢測池（斷開柱） ，以清洗流通池；
流動相要用脫過氣的，防止氣泡滯留在流通池內(nèi)，以影響分析結果；
注意氘燈的保養(yǎng)，為了節(jié)省燈的使用壽命，可在不關機的情況下，只把燈關
掉（建議：最好在需要關燈時間 4 小時以上才關燈，因為頻繁的開關燈，同樣會縮短燈的使用壽命） 。
 
注意：液相色譜儀是精密的微量分析儀器， 它的功能充分發(fā)揮離不開您的悉心呵護。