液相色譜柱的使用方法
剛開始使用液相色譜柱的朋友有沒有一種抓狂的感覺?雖然液相色譜柱都自帶說明書,但說明書說的都比較籠統(tǒng),對于新手而言,還是有難度的。今天武漢恒信世紀科技有限公司就詳細跟大家談談液相色譜柱的使用方法.
一、卡套柱的安裝(不加預柱)
1.將卡套架套入柱芯
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高 于夾套
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過夾套片
4.將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手擰緊
5.然后依同樣的 順序連接好柱子的另一端
6.連接到液相色譜儀,PEEK接頭手擰即可;若為不銹鋼接頭應 使用專用扳手
7.將"子彈頭"預柱放入卡套片內
注意:使用卡套柱時,兩端的卡套應時刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗,任何時候都不能將卡套取下來,否則會造成填料 的流失。
?、?更換色譜柱濾網和玻璃棉過濾片(同時可以修補色譜柱)
注意:在取出反相柱芯的濾網和玻璃片之前,應該將色譜柱充分用水和甲醇/乙腈沖洗,而且修補工具的頭部也應該蘸取少量的甲醇/乙 腈,以避免在取出濾網和玻璃棉濾片時帶出柱子內的填料。
1.先將修補工具中的2套入柱芯的 頂端
2.將修補工具中的3輕輕地旋入已套著2的柱芯中,并順時針方向旋轉到旋緊
3.一手握柱芯,另一只手輕輕地向外拉3,取出柱芯頂端的濾網
4.用一個小鏟子輕輕地取出濾網下面的玻璃棉以及被污染的填料
5.將新的填料用甲醇潤濕,然后填入挖去的部位,壓平
6.照(下 圖)裝上新的玻璃棉濾網,并用修補工具中的4將玻璃棉壓入柱芯頂端
7.柱芯頂端套上2, 然后將濾網放入
8.壓緊,然后取下2,再用4將濾網的邊緣壓平
?、? 平衡色譜柱
反相色譜柱在經過出廠測試后是保存在乙腈/水 中的。請一定確保您所使用的流動相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲存或運輸過程中可能會干掉,因此在用流動相分析樣品之 前,應使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱;如果您所使用的流動相中含有緩沖鹽,應注意用純水"過渡"。
硅膠柱或極性色譜柱在經過出廠測試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水的流動相,請在使用流動相之前用乙醇或異丙醇 平衡 。
?、?如何平衡色譜柱?
平衡過程中,將流速緩慢地提高,用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對試劑度如果較低,則需要較長的時間來平衡)。
?、? 色譜柱的再生
進行色譜柱再生時,應使用一個謙價的泵,我 們建議最好不使用您的高效液相色譜儀上的泵。
建議 用來沖洗的溶劑體積
注意: 在對NH2改性的色譜柱進行再生時,由于NH2可能成銨根離子的形式存在,因此應該在水洗后用0.1M的氨水沖洗,然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。如果 簡單的有機溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質,用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。